Методика проведення імуноферментного аналізу

За допомогою аналізу можна встановити етіологію хвороби, стадію її розвитку, ступінь небезпеки для людини. Для проведення діагностики необхідні ІФА-аналізатори та набори реагентів. Результати аналізу пацієнт отримує протягом 1-2 діб, що дозволяє якомога раніше призначити адекватну терапію.

Види і стадії ІФА

Постановка ІФА розділяється на прямий і непрямий аналіз. В даний час в лабораторіях частіше використовують непряму методику, так як вона дає більш точні результати.

При імуноферментному аналізі виділяють три стадії:

• Антигени фіксуються і зв'язку язуються на поверхні лунки з неміченим антитілом. Спочатку в лунки вноситися біоматеріал, потім через 20-30 хвилин додають антитіла. Через 1,5-2 години утворюється імунний комплекс. Антитіла що не зв'язку язалися видаляють, використовуючи спеціальний розчин;

• На іншому етапі до імунного комплексу додають мічені антитіла. Протягом 30 хвилин мічені антитіла скріплюються з неміченими і утворюється новий комплекс, який складається з 2-х антитіл і антигенів;

• На третьому етапі вноситися фермент, що в результаті реакції, що відбувається «мітка» через 5-30 хвилин перетворюється у забарвлену субстанцію. За допомогою колориметрії обчислюється концентрація забарвленої частини. Вона завжди буде дорівнює концентрації мічених антитіл. А їх концентрація завжди відповідає змісту мічених антитіл і відповідно концентрації антигенів.

При непрямому ІФА застосовується подвійний контроль, тобто використовується два різновиди антитіл. Це значно підвищує точність діагностики і чутливість реакції.

Ферменти як реагенти в ІФА діагностиці грають провідну роль, і до їх вибору для лабораторії пред'явлення являється ряд стандартних вимог. Основні з них:

• Висока чутливість і специфічність, що дозволяють виявити «мітку» з найнижчою концентрацією;

• Доступність. Кращі ферментні препарати повинні зберігати високу активність на всьму протязі проведення аналізу;

• Простота визначення концентрації ферменту що використовується при ІФА .

Переваги ІФА діагностики

Імуноферментний аналіз цінується за його високу чутливість і специфічність. Така діагностика дозволяє максимально точно визначити вид збудника хвороби, його концентрацію, на підставі чого і робиться висновок про стадії захворювань.

Найчастіше для дослідження необхідна сироватка венозної крові. На аналіз також береться спинномозкова рідина, секрет з цервікального каналу і уретри, рідина склоподібного тіла. При крайній необхідності ІФА можна зробити за 1-2 години.

Набори для імуноферментного аналізу, в тому числі ферменти, антигени, індикатори, можна придбати оптом і в роздрібу компанії ТОВ "Медринок". Компанія реалізує лабораторне обладнання та реактиви від провідних зарубіжних виробників.